TAMRA在熒光光譜的三個研究成果

2017-09-14 16:24:33      點擊:
TAMRA(四甲基羅丹明)由于具有量子產率高、光穩定性好、易于標記等優點,被廣泛應用于熒光光譜的研究中。本文通過探測標記在DNA上的TAMRA的熒光光譜性質的研究得到了以下三方面的研究結果:

  1、堿基G對TAMRA的猝滅機理研究。堿基G能夠有效猝滅TAMRA,這種猝滅必須通過近距離接觸實現,機理是光誘導電子傳遞(PET)猝滅方式。G位于TAMRA的同鏈或是異鏈時體現的整體猝滅效果一致,但猝滅形式不同:同鏈G對TAMRA的PET作用效率更高;互補鏈的G占據分子結構優勢,PET熒光組分比例更高。G個數越多PET作用越明顯,但沒有觀察到DNA鏈內各個堿基G之間的電荷傳遞作用。利用G能猝滅TAMRA熒光的性質可以動態監測雜交過程及定量衡量雜交程度,還可以得到一些特殊的結構信息,如發夾結構及分子鏈柔韌性等。

 2、TAMRA作為能量受體與供體熒光素(FAM)形成供受體對定量檢測DNA分子結構的研究。FAM和TAMRA作為熒光共振能量轉移作用(FRET)的供受體對,F(o)rster距離為62.4(A)。12bp、15bp DNA單標記鏈的FRET實驗中,發現從熒光壽命均可觀察到較明顯的FRET現象,但是穩態光譜卻只能觀察到供體熒光的下降,而受體熒光無增強。此現象最終證實為增強的受體熒光被互補鏈的鳥嘌呤PET猝滅,故無法觀察到受體熒光。利用加入受體前后供體熒光壽命的變化計算得到12bp、15bp DNA單標記鏈、15bp DNA雙標記鏈的鏈長分別為55.5(A)、60.8(A)、56.4(A),與DNA的B構型模型的結構信息基木相符。

  3、TAMRA標記在DNA上的構型研究。通過穩態光譜和瞬態光譜對TAMRA化學鍵合在不同序列。DNA鏈的研究,對TAMRA-DNA復合物的三種不同熒光壽命組分予以歸屬:第一,短壽命組分為G對TAMRA的PET猝滅途徑的壽命組分;第二,中問壽命值與自由TAMRA相近,為TAMRA較自由伸展在溶液中的狀態;第三,長壽命組分是TAMRA與DNA堿基形成的基態復合物的熒光組分。

來源:昀輝科技 http://www.wavenm.com/

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